產(chǎn)品名稱：

Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)
Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)
Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)
Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)
Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)
Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)

產(chǎn)品簡介：

激光片層掃描顯微系統(tǒng)助您實現(xiàn)活體和透明化樣品多視角成像

生命科學(xué)研究可能會對您的成像能力提出很高的要求，有時甚至需要您對整個活體模式生物、組織或細胞的發(fā)育過程進行成像。由于采用獨特的照明原理，激光片層掃描顯微系統(tǒng)(LSFM)非常適合對此類樣品進行快速而柔和地成像。蔡司Lightsheet 7具備良好的穩(wěn)定性，遠勝以往顯微鏡的低光毒性，讓您能夠在較長時間內(nèi)觀察活體樣品，甚至達到數(shù)天。除此之外，您還可以利用此項技術(shù)以亞細胞分辨率對大尺寸透明化樣品進行完整成像。利用專用的光學(xué)器件、樣品倉和樣品夾增強Lightsheet 7的性能，以準確地匹配您所選的透明化方法的折射率，對您的大樣品進行成像，甚至是整個鼠腦。這些靈活的特性均來自于蔡司成熟且穩(wěn)定的箱式光片設(shè)計。


  • 產(chǎn)品性能
  • 產(chǎn)品優(yōu)勢
  • 產(chǎn)品視頻
  • 產(chǎn)品應(yīng)用

  • LSFM的原理

激光片層熒光顯微系統(tǒng)(LSFM)將熒光激發(fā)與檢測分割成兩個獨立的光路，檢測軸線與照明軸線垂直。也就是說，您可以同時照亮樣品內(nèi)部很薄的一個層面，只激發(fā)這一層面的熒光，從而產(chǎn)生一個內(nèi)源性的光學(xué)切面。不需要針孔或者特殊的圖像處理。來自于焦平面的熒光通過相機靶面一次成像，而不是像共聚集或者其他激光掃描顯微鏡那樣逐點成像。與其它顯微鏡技術(shù)相比，基于相機靶面檢測器的并行圖像采集更快速，且所需的激發(fā)光強更小。總而言之，LSFM將光學(xué)切面效果與焦平面圖像的并行采集相結(jié)合，令三維成像達到非常快的速度，且大大提高了光效率。


將檢測光學(xué)器件從照明光學(xué)器件中分離出來，這樣就能用低數(shù)值孔徑的專用透鏡進行熒光激發(fā)，而不會損失檢測圖像的分辨率和靈敏度。這使得LSFM成為毫米級樣品成像的理想選擇，例如，正在發(fā)育的生物體或者大型的透明化組織樣品。

 Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)


  • 獲專利的蛇形掃描振鏡

提供均勻的照明

當(dāng)激光片層穿過樣品時，一些諸如細胞核的樣品結(jié)構(gòu)會吸收或散射激發(fā)光。這樣就會沿照明軸投射陰影，如左圖所示。所有熒光顯微鏡都會出現(xiàn)這種現(xiàn)象，但在激光片層掃描顯微技術(shù)中，因照明軸與觀察軸垂直，所以這種效果更為明顯。在Lightsheet 7中，獲專利的Pivot Scanner技術(shù)可以在圖像采集時向上或向下調(diào)節(jié)激光片層的角度。如右圖所示，通過改變照明角度，讓陰影投射到不同的方向上，激發(fā)光也將到達不透明結(jié)構(gòu)后面的區(qū)域。因此，這款獲專利的Pivot Scanner非常適合用于采集無偽影圖像并改進下游處理和分析步驟，從源頭開始處理偽影始終都是更好的做法。

Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng) Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)


  • 透明化樣品成像

您所選擇的透明化方法將取決于您要成像的組織類型、熒光標記物以及樣品本身的大小。蔡司Lightsheet 7設(shè)計用于匹配所有這些不同條件。您可以在幾乎所有透明化溶液中對折射率從1.33到1.58之間，最大尺寸為2 cm的樣品進行成像。穩(wěn)定的一站式Lightsheet 7成像系統(tǒng)，即可以幫助您以亞細胞分辨率獲取整個樣品的圖像和數(shù)據(jù)。無論是透明化的類器官、細胞團、器官、腦還是其它樣品，Lightsheet 7顯微鏡都是您實現(xiàn)快速柔和的LSFM成像的理想之選。

Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)

灌注 PBS、CellTracker? CM-DiI 染料和4% PFA的C57 BL6J小鼠。使用iDISCO+方法進行透明化處理，最終RIMS為肉桂酸乙酯。

樣品由美國馬薩諸塞州劍橋市哈佛大學(xué)哈佛生物成像中心的Erin Diel提供。


  • 獲得更好的圖像質(zhì)量和穩(wěn)定性

Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)

操作便捷的Lightsheet 7，可以讓您的LSFM成像更進一步，應(yīng)對更廣泛的應(yīng)用，實現(xiàn)更優(yōu)異的圖像質(zhì)量。全新設(shè)計的光學(xué)器件和樣品倉讓您能夠根據(jù)需要調(diào)整折射率。全新樣品夾令安裝更大的樣品變得簡單。智能軟件工具幫助您調(diào)整各種成像參數(shù)，例如激光片層和樣品位置、正確的縮放設(shè)置、拼圖和多點以及數(shù)據(jù)處理參數(shù)。所有這些全新功能均與產(chǎn)生照明光片的柱面透鏡和激光掃描這對可靠蔡司組合密切相關(guān)。Lightsheet 7還配備獲專利的Pivot Scan掃描技術(shù)，以得到圖像質(zhì)量更好且無偽影的光學(xué)切片。


  • 觀察真實生命活動--快速而靈敏

蔡司Lightsheet 7以pco.edge sCMOS檢測器的高量子轉(zhuǎn)換效率為特點，讓您能夠在較低的照明下就能觀察快速變化的過程。這樣，您便可以獲得樣品的實時圖像，而不必擔(dān)心激發(fā)光對它們的生理產(chǎn)生不良影響。對于垂直定向的樣品和需要高幀率時，可以選擇使用蔡司Axiocam 702 CMOS相機：特殊樣品倉可提供加熱、制冷功能，并可提供CO2，為您的實驗維持合適的環(huán)境。它還配備 了多視角和同步觸發(fā)選項，以控制外部設(shè)備。幾乎任意范圍內(nèi)，Lightsheet 7是您實時觀察生物體生命過程的理想系統(tǒng)。

Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)

擬南芥花的發(fā)育圖像-樣品：圖片由捷克共和國布爾諾市馬薩里克大學(xué)中歐技術(shù)研究院（CEITEC）的S. Valuchova、P. Mikulkova和K. Riha提供。




  • 腎臟學(xué)

使用iDISCO+方法對小鼠腎臟進行透明化處理，并使用蔡司Lightsheet 7成像物鏡5× / 0.16 foc和Clr 20× / 1.0 nd = 1.53（浸入）在肉桂酸乙酯中進行成像。使用DyLight 594耦合番茄凝集素灌注小鼠，從而標記血管和腎小球（紅色）。綠色：組織結(jié)構(gòu)的自發(fā)熒光。三維全器官成像和腎小球尺寸和數(shù)量的圖像分析，有助于更好地了解各種腎臟疾病的機制，例如糖尿病性腎病。該圖像在ACQUIFER HIVE上使用arivis Vision4D?處理。

Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)

? ? ? ? 樣品由丹麥Gubra公司的U. Roostalu提供。


  • 發(fā)育生物學(xué)

P10小鼠氣管的三維數(shù)據(jù)集顯示了力敏感神經(jīng)纖維的解剖結(jié)構(gòu)。染色：DAPI,IV型膠原蛋白（Alexa 488 抗體），感官纖維（表達tdTomato的報告菌株，Alexa 555抗體），神經(jīng)纖絲蛋白NF200（有髓鞘的神經(jīng)纖維，Alexa 647抗體）。


用PEGASOS（Jing et al:, 2018, Cell Research）對樣品進行透明化處理，在折射率為1.54的BB-PEG中，分別使用成像物鏡5× / 0.16 foc和Cl r 20× / 1.0 nd = 1.53進行成像。5x物鏡數(shù)據(jù)集：像素尺寸0.61 × 0.61 × 1.63微米，3×3拼圖，放大1.5倍，1230個z截面，體積2.57 × 2.58 × 2 mm。20x物鏡數(shù)據(jù)集：像素尺寸0.23 × 0.23 × 0.58微米，1×5拼圖，放大1.0倍，4206個z截面，體積2.0 × 0.45 × 1.82 mm。

Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)

 Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)
樣品由德國柏林發(fā)育生物學(xué)/信號轉(zhuǎn)導(dǎo)實驗室的P.-L. Ruffault和C. Birchmeier；高級光學(xué)顯微鏡技術(shù)公司的A. Sporbert和M. Richter；以及德國柏林分子醫(yī)學(xué)中心的M. Delbrück提供。


  • 脊椎動物肢體、脊髓再生

蠑螈目動物具有奇異的四肢和脊髓再生能力。借助分子遺傳學(xué)工具，可以識別促成這種復(fù)雜再生的干細胞，以及激發(fā)細胞增殖的創(chuàng)傷應(yīng)激信號。此蠑螈的前臂已在肉桂酸乙酯中進行了透明化處理（Masselink, W. et al. Development 146, (2019)），并使用成像物鏡5× / 0.16 foc以1.57的折射率進行成像。使用ZEN成像軟件和arivis Vision4D?軟件在ACQUIFER HIVE數(shù)據(jù)平臺上對多拼圖數(shù)據(jù)集進行校準、融合和渲染。

Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)

樣品由分子病理學(xué)研究院(IMP)田中實驗室的W. Masselink提供。

圖片由奧地利維也納IMP BioOptics公司的P. Pasierbek和K. Aumayr提供。


  • 神經(jīng)形態(tài)學(xué)

Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)

樣品由奧地利維也納分子生物技術(shù)研究所的. Reumann和J. Knoblich提供。

人腦中的神經(jīng)元非常精密復(fù)雜，而且它們遍布于整個腦器官中，因此對人腦中的所有細胞進行成像是一項幾乎不可能完成的任務(wù)。類器官可以在一定程度上再現(xiàn)人腦，包括從神經(jīng)元干細胞培養(yǎng)中產(chǎn)生神經(jīng)元。借助于ECi進行透明化處理，可以從局部到整體研究神經(jīng)元形態(tài)學(xué)，為三維神經(jīng)元形態(tài)的研究開創(chuàng)了極具吸引力的可能性。

35日齡的神經(jīng)元類器官，使用GFP/ tdtomato（3% GFP和3% tdtomato）稀疏標記，并使用Clr 20× / 1.0 nd = 1.53物鏡成像。

像素尺寸：222 × 222 × 567 nm。

圖像體積：1.66 × 0.66 × 1.6 mm。



  • 免疫學(xué)

對完整的淋巴器官進行三維成像，可以分析并量化淋巴對病毒感染的免疫反應(yīng)。在采集之前，將T細胞轉(zhuǎn)移至野生型宿主小鼠體內(nèi)。使用Ce3D（Li et al. PNAS 163, 2017）對淋巴結(jié)進行清潔、固定和透明化處理，然后使用5× / 0.16成像物鏡（體積2.5 × 2.5 × 1.6 mm）在1.49的折射率(ph 7)對其進行成像。圖像顯示GFP標記的初始CD8+ T細胞（黃色），B細胞濾泡用B220（青色）染色，血管網(wǎng)絡(luò)用CD31（洋紅色）染色。

Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)

樣品由澳大利亞亞帕克維爾區(qū)沃爾特及伊萊薩霍爾醫(yī)學(xué)研究院的Joanna Groom提供。



  • 整個鼠腦的血管圖譜

使用PBS和4% PFA灌注一只C57 BL6J小鼠。腦部通過灌注Cell-Tracker? CM-DiI染料進行染色，這是一種用于標記血管膜的脂類染料。使用iDISCO+方法對樣品進行透明化處理，并以肉桂酸乙酯作為最終的折射率匹配溶液進行平衡。然后，使用Fluar 2.5× / 0.12成像物鏡在Translucence介觀尺度成像倉中，以RI=1.565的肉桂酸乙酯中進行成像。

右側(cè)插入的高分辨率圖像使用Clr Plan-Neofluar 20× / 1.0 Corr nd = 1.53采集。Image 圖像體積為13.1 × 13.1 × 6 mm，像素分辨率為1.83 × 1.83 × 6.77 μm。在大約40分鐘內(nèi)以4×4拼圖、866個z截面采集。數(shù)據(jù)量為93 GB。使用ZEN成像軟件和arivis Vision4D?在ACQUIFER HIVE數(shù)據(jù)平臺上處理數(shù)據(jù)。

 Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)

Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)

? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?樣品由美國劍橋市哈佛大學(xué)的E. Diel和D. Richardson提供。


  • 整個鼠腦的中間神經(jīng)元和浦肯野細胞圖譜

使用CLARITY方法對PV-tdtomato鼠腦進行透明化處理，并使用EasyIndex以1.46的折射率進行最終成像。

tdtomato-小清蛋白受Parvalbumin-Cre 控制，表達在大腦的中間神經(jīng)元和小腦的浦肯野細胞中。腦部數(shù)據(jù)集使用5× / 0.16 foc成像物鏡在蔡司Lightsheet 7上獲取。圖像體積為11 × 20 × 8.8 mm，像素分辨率為0.91 × 0.91 × 5.35 μm（12028 × 22149 × 1621體素）。以6×10拼圖、1621個z截面采集。數(shù)據(jù)量為1.2 TB（拼接后為805 GB）。使用ZEN成像軟件和arivis Vision4D?在ACQUIFER HIVE數(shù)據(jù)平臺上處理數(shù)據(jù)。

Lightsheet 7 激光片層掃描顯微系統(tǒng)

樣品由美國劍橋市哈佛大學(xué)的E. Diel和D. Richardson提供。