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產(chǎn)品中心

產(chǎn)品名稱：

Apotome 3 寬場顯微鏡熒光成像的光學切片

產(chǎn)品簡介：

寬場顯微鏡熒光成像的光學切片

為您的熒光樣品創(chuàng)建光學切片——無雜散光。利用結(jié)構(gòu)照明，可以簡單有效地消除非焦平面雜散光，便于完全專注于科學研究。蔡司Apotome 3能夠識別放大倍率并將適當?shù)臇鸥褚浦凉饴分?。隨后，系統(tǒng)會從不同柵格位置的多幅圖像中計算出光學切片圖像。它是一種非常有效的消除非焦平面雜散光的方法，同樣適用于比較厚的樣品。系統(tǒng)操作非常簡便。優(yōu)質(zhì)的光學切片——讓您獲得出色分辨率和高對比度圖像。

產(chǎn)品性能
產(chǎn)品優(yōu)勢
產(chǎn)品視頻
產(chǎn)品應(yīng)用

工作原理

√ 優(yōu)化光學切片厚度的三種柵格

您的相機能夠檢測到焦平面以外的光。根據(jù)試樣的厚度和體積降低對比度和分辨率（圖A：通過傳統(tǒng)反射熒光照明法獲取圖像）。

蔡司Apotome 3可自動將匹配的柵格放入顯微鏡光路中，不受放大倍數(shù)的影響。減少不需要的背景熒光能夠增加?xùn)鸥竦念l率，使光學切片變得更薄。來自焦平面以外的圖像信息則受到抑制（圖B、C和D），因此改善了光學切片的對比度和分辨率。示例（圖D）中，“低柵格”可優(yōu)化切片厚度。此類圖像尤其適用于3D分析以及通過渲染軟件處理圖像數(shù)據(jù)。

秀麗隱桿線蟲，全樣載片，綠色：GFP，藍色；DAPI，物鏡：Plan-Apochromat 20 ×/0.8 視頻由德國布倫瑞克工業(yè)大學的Schnabel教授提供。

√ 掃描機理

蔡司Apotome 3將柵格結(jié)構(gòu)投射到樣品的焦平面，隨后使用掃描機構(gòu)將其移至不同位置。Apotome 3在每一柵格位置都能夠自動獲取一張數(shù)字圖像。系統(tǒng)使用特有算法將所有的圖像處理成一個具有高對比度和分辨率的光學切片。產(chǎn)生的圖像無柵格結(jié)構(gòu)。

熒光激發(fā)光會穿過Apotome 3載玻片中的兩塊玻璃板。當柵格結(jié)構(gòu)應(yīng)用于第一塊玻璃板時，柵格圖案會被投影激發(fā)光中。掃描組件機構(gòu)會傾斜第二塊玻璃板，柵格圖像便在樣品的焦平面內(nèi)平移。

柵格投影示意圖。A：寬場圖像。B – D：不同柵格位置的原始圖像。E：通過樣品得到的光學切片。結(jié)構(gòu)化照明可以有效地消除焦外雜散光（箭頭所示）。

√ 優(yōu)質(zhì)的光學切片：蔡司Apotome 3具有三種不同幾何性狀的柵格，無論您選擇何種放大倍率，都可以保證高分辨率。

√ 自由選擇光源和染料：蔡司Apotome 3可適應(yīng)熒光團和光源。因此，當實驗的復(fù)雜性和需求發(fā)生變化時，您也可以靈活應(yīng)對。

√ 更多結(jié)構(gòu)化信息：憑借結(jié)構(gòu)照明的專利算法，您甚至可通過反卷積進一步改善圖像質(zhì)量。更好地識別所檢查對象的重要結(jié)構(gòu)。

優(yōu)質(zhì)的光學切片

要對尺寸從幾百微米到幾納米范圍內(nèi)的結(jié)構(gòu)進行成像，通常需要不同放大倍數(shù)的物鏡。Apotome 3具有三種不同幾何形狀的柵格，可保證每一顆物鏡成像的高分辨率。您只需要關(guān)注實驗本身，因為系統(tǒng)可自動選擇合適的柵格，時刻確保獲得高對比度的光學切片。與傳統(tǒng)寬場熒光顯微圖像相比，Apotome 3能夠顯著提高軸向分辨率：您可以獲得支持三維渲染的優(yōu)質(zhì)光學切片，厚的樣品也不例外。

自由選擇光源和染料

實驗的復(fù)雜性和需求往往隨著時間發(fā)生變化。因此您的設(shè)備不僅需要注重性能，還應(yīng)具有靈活性。將Apotome 3與傳統(tǒng)的金屬鹵化物燈、經(jīng)濟型LED白光光源或柔光、多色Colibri照明系統(tǒng)結(jié)合使用。使用時僅需更換濾色片，系統(tǒng)便會自動將柵格移至正確位置。任何染料都不受技術(shù)上的制約：不論是DAPI、Alexa488、Rhodamin、Cy5還是活體染料，如GFP或mCherry——Apotome 3都能夠適應(yīng)熒光和光源，生成您期望的優(yōu)質(zhì)清晰圖像。

Apotome 3 寬場顯微鏡熒光成像的光學切片

由德國萊布尼茨老齡化研究所-弗里茨-利普曼恩研究院(FLI)的L. Behrendt提供

更多結(jié)構(gòu)化信息

憑借結(jié)構(gòu)照明的特有算法，您甚至可以借助蔡司Apotome 3通過反卷積進一步改善圖像質(zhì)量。在保留所有原始數(shù)據(jù)的同時，該系統(tǒng)還允許在寬場、光學切片以及反卷積的圖像之間切換，實現(xiàn)出色的靈活性和兼容性。反卷積算法快速、穩(wěn)健且易于使用，能夠改善圖像的橫向和軸向分辨率。因?qū)Ρ榷雀纳?、光學分辨率更高且現(xiàn)有噪聲得到抑制，您可以更好地識別樣品更細微的結(jié)構(gòu)。

典型應(yīng)用

細胞培養(yǎng)	二維成像	√ 二維單幅圖像
	二維圖像快速掃描	√?顯示器中光學切片可在線使用
	在強本底熒光下可靠地檢測標記	√?自動選擇柵格，優(yōu)化每一顆物鏡的對比度
	多種觀察技術(shù)結(jié)合使用	√?熒光通道、明場、DIC和相襯任意組合 √?個性化配置每一個熒光通道，可作為光學切片或?qū)拡鰣D像
活細胞成像	減少光毒性	√?結(jié)合使用LED照明和高敏度相機（如蔡司Axiocam）后，光毒性更低
活細胞成像	延時圖像	√?根據(jù)曝光時間的不同，速度可達每秒三張圖像 √?“連拍模式”下幀速加倍
振動切片機切片，組織學樣品	三維成像	√?為每一顆物鏡自動選擇匹配的柵格
	更改光片切片厚度	√?可根據(jù)試樣自由選擇柵格
	穿透深度	√?取決于組織的光密度
	三維重建	√?通過集成軟件功能渲染圖像 √?自動傳輸單個熒光通道的參數(shù)
	定量分析	√?通過自動系統(tǒng)校準可重復(fù)測量尺寸
全樣載片	三維成像	√?多通道，Z軸序列，延時，去卷積，原始數(shù)據(jù)模式中的圖像，3D渲染
全樣載片	大圖像區(qū)域	√?使用“拼圖和位置”自動獲取大切片圖像

應(yīng)用案例

√ 果蠅神經(jīng)元

分子和發(fā)育基因?qū)W，比利時魯汶大學

果蠅神經(jīng)元，藍色：DAPI，黃色：GFP。物鏡：Plan-Apochromat 20×/0.8。視頻由比利時魯汶大學分子和發(fā)育基因?qū)W的M. Koch提供。

左圖：傳統(tǒng)寬場熒光。? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 右圖：蔡司光學切片Apotome 3

√ 果蠅胚胎

德國明斯特大學神經(jīng)生物學研究所

果蠅胚胎，綠色：HRP，紅色：神經(jīng)膠質(zhì)標記物，100 μm Z-棧。視頻由德國明斯特大學神經(jīng)生物學研究所的C. Kl?mbt提供。

√?小鼠胚胎

德國哥廷根大學解剖學中心

小鼠胚胎，組織切片，綠色：GFP，紅色：Cy3.物鏡：Plan Apochromat 40×/1.3 Oil。視頻由德國哥廷根大學解剖學中心的N. Büttner和T. Vogel提供。